HEALTH OF WOMAN.2016.7(113):166–170; doi 10.15574/HW.2016.113.166 
 

Опыт проведения циклов вспомогательных репродуктивных технологий с размораживанием, биопсией, генетическим исследованием и рефризингом эмбрионов у пациенток с многоразовыми неудачными имплантациями 
 

Маслий Ю. В., Судома И. О., Мазур П. С., Микитенко Д. А., Осадчук С. В.

Клиника репродуктивной медицины «НАДЕЖДА», г. Киев

Национальная медицинская академия последипломного образования имени П.Л. Шупика, г. Киев

Национальный медицинский университет им. А.А. Богомольца, г. Киев

Цель исследования: изучение возможности использования замороженных бластоцист для биопсии и генетического тестирования и определение результативности переноса еуплоидних 5–7-суточных зародышей после размораживания, биопсии, повторного замораживания и размораживания пациенткам с неудачными имплантациями.

Материалы и методы. Объектом исследования были группы пациенток с многократными неудачами имплантации (і4) в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) при условии переноса в полость матки суммарно (то есть во всех проведенных программах) не менее 6 эмбрионов хорошего качества (по морфологическим признакам). Все женщины имели достаточный резерв яичников. Пациентки проходили лечение бесплодия в рамках программ ВРТ клиники репродуктивной медицины «Надия» в период с 2006 по 2016 г. В выборку были включены пары, которые не были носителями хромосомных перестроек, без аномалий матки (врожденных и приобретенных: удвоение матки, однорогая матка, внутриматочная перепонка, синехии, субмукозная миома матки). Все женщины имели положительный ответ яичников на контролируемую стимуляцию гонадотропинами (не менее 7 ооцитов) и достаточное количество криоконсервированных эмбрионов. В первую группу (Г1) вошли 64 женщины, которым трофектодермальную биопсию проводили на свежих бластоцистах (в цикле с контролируемой гиперстимуляцией яичников). Во вторую группу (Г2) была включена 31 женщина, которым проводили размораживание предварительно криоконсервированных бластоцист, трофектодермальную биопсию и повторную витрификацию бластоцист.

Результаты. Было выявлено, что результативность переносов эуплоидных эмбрионов, которые были витрифицированы, биоптированы и ревитрифицированы, немного ниже, чем у тех, которые были биоптированы свежими и витрифицированы всего раз. В то же время доимплантационная генетическая диагностика ранее витрифицированных бластоцист с использованием сравнительной гибридизации геномов у пациентов с повторными неудачными имплантациями позволяет получить приемлемую частоту наступления беременности (58%), частоту имплантации (33,3%) и рождение живых детей (45,1%).

Заключение. Рефризинг биоптированных эмбрионов не вызывает существенного разрушительного воздействия и позволяет достичь наступления беременности и рождения живого ребенка.

Ключевые слова: экстракорпоральное оплодотворение, многоразовые неудачные имплантации, метод сравнительной гибридизации геномов, рефризинг.

Литература:

1. Микитенко Д.А. Клиническая апробация алгоритма лечения бесплодия методами ВРТ с применением ACGH-ПГС / Д.А. Микитенко, В.Д. Зукин // Вестник Уральской медицинской академической науки. – 2013. – № 3 (45). – С. 5–15.

2. Capalbo A. FISH reanalysis of inner cell mass and trophectoderm samples of previously array-CGH screened blastocysts shows high accuracy of diagnosis and no major diagnostic impact of mosaicism at the blastocyst stage / A. Capalbo, G. Wright, T. Elliott [et al.] // Hum.Reprod. – 2013. – Vol. 28, № 8. – P. 2290–2307. http://dx.doi.org/10.1093/humrep/det245

3. Cobo A. Outcome of cryotransfer of embryos developed from vitrified oocytes: double vitrification has no impact on delivery rates / A. Cobo, D. Castello, B. Vallejo, C. Albert, J.M. de los Santos, J. Remohi // Fertility and Sterility – 2013. 99, 1623–1630. http://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2013.01.106; PMid:23415972

4. Elgindy E. Day 5 expanded blastocysts transferred on same day have comparable outcome to those left for more extended culture and transferred on day 6 / E. Elgindy, M.S. Elsedeek // J. Assist. Reprod. Genet. 2012. 29, 1111–1115. http://dx.doi.org/10.1007/s10815-012-9837-4; PMid:22847372 PMCid:PMC3492570

5. Harton G. ESHRE PGD consortium best practice guidelines for organization of a PGD centre for PGD/preimplantation genetic screening / G. Harton, P. Braude, A. Lashwood, A. Schmutzler [et al.] // Human Reproduction, Vol. 26, No.1. – Р. 14–24, 2011 Advanced Access publication on October 21, 2010 doi:10.1093/humrep/deq229/

6. Hiraoka K. Vitrified human day-7 blastocyst transfer: 11 cases / K. Hiraoka, M. Fuchiwaki, K. Hiraoka, T. Horiuchi, S. Okano, M. Kinutani, K. Kinutani // Reprod. Biomed. Online 2008. 17, 689–694. http://dx.doi.org/10.1016/S1472-6483(10)60317-3

7. Hiraoka K. Perinatal outcomes following transfer of human blastocysts vitrified at day 5, 6, and 7. K. Hiraoka, M. Miyazaki, E. Fukunaga, T. Horiuchi, T. Kusuda, S. Okano, M. Kinutani, K. Kinutani // J. Exp. Clin. Assist. Reprod. 2009a. 20, 4–8.

8. Kovalevsky G. Should embryos developing to blastocysts on day 7 be cryopreserved and transferred: an analysis of pregnancy and implantation rates / S.M. Carney, L.S. Morrison, C.F. Boylan, A.B. Neithardt, R.F. Feinberg // Fertil. Steril. 2013.100, 1008–1012. http://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2013.06.021; PMid:23876530

9. Kumasaco Y. The efficacy of the transfer of twice frozen-thawed embryos with the vitrification method / Y. Kumasako, E. Otsu, T. Utsunomiya, Y. Araki // Fertil. Steril. 2009; 91: 383–6. http://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2007.11.079; PMid:18295762

10. Lee E. The clinical effectiveness of preimplantation genetic diagnosis for aneuploidy in all 24chromosomes (PGD-A):systematic review / E. Lee, P. Illingworth, L. Wilton, G. M. Chambers // Human Reproduction,Vol.30, No.2pp.473–483, 2015. http://dx.doi.org/10.1093/humrep/deu303; PMid:25432917

11. Montag M. Birth after double cryopreservation of human oocytes at metaphase II and pronuclear stages / M. Montag, K. van der Ven, Dorn, C., Isachenko, V., Isachenko, E., van der Ven, H. // Fertility and Sterility, 2006. 85, e5–e7. http://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2005.11.037; PMid:16500354

12. Munnй S. Diagnosis of major chromosome aneuploidies in human preimplantation embryos / S. Munnй, A. Lee, Z. Rosenwaks, J. Grifo, J. Cohen // Hum. Reprod. 1993;8:2185–2191.

13. Munne S. Technology requirements for preimplantation genetic diagnosis to improve assisted reproduction outcomes / S. Munne, D. Wells, J. Cohen // Fertility and Sterility. 2010. – Vol. 94. – P. 408–430. http://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2009.02.091; PMid:19409550

14. Murakami M. Perintatal outcome of twice-frozen-thawed embryo transfers: a clinical follow-up study /M. Murakami, A. Egashira, K. Murakami, Y. Araki, T. Kuramoto // Fertil. Steril. 2011; 95: 2648–50. http://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2010.12.038; PMid:21256487

15. Pehlivan D. Loss of heterozygosity at chromosome 14q is associated with poor prognosis in head and neck squamous cell carcinomas / D. Pehlivan, E. Gunduz, M. Gunduz, H. Nagatsuka, L.B. Beder [et al.] // J. Cancer Res. Clin. Oncol. (2008). 134: 1267–1276. http://dx.doi.org/10.1007/s00432-008-0423-1; PMid:18521630

16. Schoolcraft W.B. Clinical application of comprehensive chromosomal screening at the blastocyst stage / W.B. Schoolcraft, E. Fragouli, J. Stevens, S. Munne, M.G. Katz-Jaffe, D. Wells // Fertil. Steril. 2010; 94: 1700–1706. http://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2010.07.090; http://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2009.10.015; PMid:19939370

17. Scott Jr. Cleavage-stage biopsy significantly impairs human embryonic implantation potential while blastocyst biopsy does not: a randomized and paired clinical trial / Jr. Scott, K.M. Upham, E.J. Forman, T. Zhao, N.R. Treff // Fertility and Sterility. 2013b;100:624–630. http://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2013.04.039; PMid:23773313

18. Smith L.K. Live birth of a normal healthy baby after a frozen embryo transfer with blastocysts that were frozen and thawed twice / L.K. Smith, E.H. Roots, M.J. Dorsett // Fertil. Steril. 2005;83:198–200. http://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2004.07.953; PMid:15652908

19. Spandorfer S.D. Relationship between maternal age and aneuploidy in in vitro fertilization pregnancy loss / S.D. Spandorfer, O.K. Davis, L.I. Barmat, P.H. Chung, Z. Rosenwaks // Fertil. Steril. 2004;81:1265–1269. http://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2003.09.057; PMid:15136087

20. Taylor T.H. Outcomes of blastocysts biopsied and vitrified once versus those cryopreserved twice for euploid blastocyst transfer / H. Taylor, J.L. Patrick, SA. Gitlin, M.J. Wilson, C.L. Jack, G.K. Darren // Reproductive Bio Medicine Online (2014) 29, 59– 64. http://dx.doi.org/10.1016/j.rbmo.2014.03.001; PMid:24794643